DNA抽提(tí)是很(hěn)多(duō)分(fēn)子生物(wù)學應(yīng)用中的(dí)必要方(fāng)法(fǎ)。有很(hěn)多商業化的試劑盒(hé)可以幫助實現(xiàn)此(cǐ)過程(chéng)。選擇正確的(dí)
貝(bèi)克(kè)曼(màn)DNA純化(huà)試(shì)劑(jì)盒(hé)可以(yǐ)為(wéi)實(shí)驗(yàn)的(dí)優(yōu)化(huà)和實施(shī)節(jié)省(shěng)更多(duō)寶(bǎo)貴(guì)的時(shí)間。
在(zài)選擇(zé)試(shì)劑盒時,重要(yào)的(dí)變量可(kě)能(néng)是你(nǐ)所使用的生物(wù)體(tǐ)。
1.細菌:許多(duō)試(shì)劑盒(hé)都(dū)有(yǒu)用於細菌DNA分(fēn)離的不同成分,這些(xiē)試劑盒之(zhī)間的主(zhǔ)要區別在於(yú)細胞是如(rú)何被(bèi)分解(jiě)的(dí),因(yīn)為有(yǒu)些(xiē)細菌(jūn)比其他細(xì)菌更(gēng)更有挑戰性(xìng)。
例如(rú),形成生(shēng)物膜(mó)的(dí)細菌(jūn)可能比傳統(tǒng)的基於去(qù)垢劑的(dí)方法需(xū)要(yào)更(gēng)強的(dí)裂解(jiě)技術。
2.動(dòng)物組織:用於(yú)動物組織貝克(kè)曼(màn)DNA純化試(shì)劑(jì)盒通(tōng)常(cháng)具(jù)有(yǒu)更溫(wēn)和(hé)的裂解(jiě)技術,因(yīn)為(wéi)大(dà)多數動(dòng)物細(xì)胞不(bù)像細(xì)菌細胞那樣(yàng)有細胞(bāo)壁。
然(rán)而,動(dòng)物組(zǔ)織(zhī)DNA提取(qǔ)的(dí)挑戰往(wǎng)往(wǎng)在於選擇合適(shì)的(dí)組(zǔ)織(zhī)匀(yún)漿(jiāng)方法(fǎ)。此外,許多(duō)動物DNA試(shì)劑盒不使用苯(běn)酚萃(cuì)取或乙(yǐ)醇作為(wéi)沉澱步(bù)驟,以減少破壞DNA的風險。
3.植物:當(dāng)涉及(jí)到(dào)植(zhí)物DNA分(fēn)離時,必(bì)須(xū)考慮(lǜ)到其他一些(xiē)因(yīn)素,需(xū)要注(zhù)意汙(wū)染物(wù)的去除。
植(zhí)物在純化(huà)過程中(zhōng)通(tōng)常(cháng)含(hán)有(yǒu)未(wèi)分(fēn)離(lí)的(dí)糖(táng),因(yīn)此(cǐ),洗滌劑(jì)選擇(zé)性地與DNA結合並(bìng)從溶(róng)液中(zhōng)析(xī)出,通常是先將洗(xǐ)滌(dí)劑溶(róng)解在(zài)高濃度的(dí)鹽溶液(yè)中,然(rán)後(hòu)提取DNA。
4.血(xiě)液:由(yóu)於技術上的許多(duō)新進展,血液貝克(kè)曼DNA純(chún)化試(shì)劑盒中有(yǒu)多種(zhǒng)裂(liè)解(jiě)技(jì)術和提(tí)取方法可供選擇(zé)。從(cóng)血(xiě)液中分離出(chū)的DNA將(jiāng)在很大程度(dù)上決定(dìng)你使用的裂解和提取的(dí)類(lèi)型。
無(wú)論應用(yòng)是(shì)什(shí)麼(mó),一定要(yào)選(xuǎn)擇一種能(néng)夠提供(gōng)純(chún)淨(jìng),完整(zhěng),雙鏈和濃縮(suō)DNA的(dí)試劑盒,以獲得理(lǐ)想效(xiào)果(guǒ)。