貝(bèi)克曼流式細(xì)胞(bāo)儀熒(yíng)光微球是一(yī)種(zhǒng)常(cháng)用的(dí)流量測量儀器(qì),流(liú)式(shì)細胞計是(shì)對(duì)細胞(bāo)進行自(zì)動分析(xī)和分選(xuǎn)的(dí)裝(zhuāng)置(zhì)。它可(kě)以快速(sù)測(cè)量,存貯(zhù),顯(xiǎn)示懸(xuán)浮(fú)在液體中的(dí)分散(sàn)細胞(bāo)的一(yī)係(xì)列重(zhòng)要的(dí)生物物(wù)理(lǐ),生物化學方(fāng)麵的(dí)特(tè)征參(cān)量,並(bìng)可以(yǐ)根(gēn)據(jù)預選的(dí)參量範(fàn)圍(wéi)把(bǎ)一定的細(xì)胞(bāo)亞群從中分選(xuǎn)出(chū)來(lái)。
流式(shì)細胞儀(yí)在(zài)使(shǐ)用(yòng)前(qián),甚至(zhì)在使用過(guò)程中都(dū)要精心進(jìn)行調(tiáo)試,以(yǐ)保證工作的可靠性和最佳性(xìng)。調(tiáo)試(shì)的(dí)項目主要(yào)是(shì)激(jī)光強(qiáng)度,液流速度和(hé)測(cè)量(liáng)區的光(guāng)路等(děng)。
1,激光強度(dù):除(chú)調(tiáo)整反射鏡(jìng)的角(jiǎo)度以(yǐ)調整到(dào)所(suǒ)需(xū)波(bō)長(cháng)的激(jī)光(guāng)出(chū)光(guāng)外,還要結(jié)合(hé)顯(xiǎn)示屏上(shàng)的光(guāng)譜曲綫使激光(guāng)的(dí)強度輸(shū)出(chū)為最大。
2,液(yè)流速(sù)度:可通過操作台(tái)數(shù)字顯示監督,調節氣體壓力大小以獲(huò)得(dé)穩定的液流速(sù)度(dù)。
3,測量區(qū)光路調節:這(zhè)是(shì)調試工作的關鍵。需(xū)要(yào)保(bǎo)證在測量區的(dí)液(yè)流,激(jī)光(guāng)束,90散(sàn)射(shè)測量光(guāng)電係統垂直(zhí)正(zhèng)交(jiāo),而(ér)且交點較小。一般可在(zài)用標(biāo)準熒光(guāng)微(wēi)球等校(xiào)準中完(wán)成(chéng)。
流式細胞(bāo)術中所(suǒ)測(cè)得(dé)的量是(shì)相對值,因(yīn)此需要(yào)在(zài)使(shǐ)用(yòng)前(qián)或使用中對係統(tǒng)進行(háng)校準或標定,這(zhè)樣才能(néng)通過相(xiāng)對(duì)測(cè)量(liáng)獲(huò)得(dé)絕對的(dí)意義。因(yīn)而FCM中的校準具有(yǒu)雙(shuāng)重功(gōng)能:儀器(qì)的準(zhǔn)直(zhí)調(tiáo)整和定(dìng)量(liáng)標度。標(biāo)準(zhǔn)樣(yàng)品(pǐn)應該穩定(dìng),有(yǒu)形成份形(xíng)狀(zhuàng)應(yīng)是(shì)大小比較一(yī)致球(qiú)形(xíng),樣品分散性(xìng)能(néng)良好(hǎo),且經濟(jì),容(róng)易獲(huò)得。常用標準熒光微(wēi)球作(zuò)為(wéi)非生物(wù)學(xué)標(biāo)準樣(yàng)品(pǐn),雞(jī)血(xiě)紅(hóng)細胞(bāo)做為生(shēng)物學(xué)標(biāo)準樣品。微球用樹脂(zhī)材料製作,或(huò)標(biāo)有(yǒu)熒(yíng)光素,或不(bù)標(biāo)記(jì)熒(yíng)光素。