實(shí)驗室工(gōng)作中(zhōng)，經常(cháng)會需(xū)要(yào)用到純化的(dí)DNA，這(zhè)時(shí)我們(mén)通常需要使(shǐ)用一(yī)個(gè)
貝克曼(màn)DNA純化(huà)試劑盒(hé)對目的DNA進行(háng)分離純化。目前(qián)大(dà)多(duō)數試劑盒(hé)遵(zūn)循(xún)相同的(dí)基本步(bù)驟:裂(liè)解(jiě)，柱純化，洗(xǐ)滌雜質(zhì)，柱洗脫。然而(ér)，不同的盒(hé)子在完成(chéng)每(měi)個步(bù)驟的方(fāng)式(shì)上有(yǒu)很大的(dí)不同。
貝(bèi)克曼(màn)DNA純化試(shì)劑盒提供了(liǎo)從各(gè)種來源(yuán)的細菌(jūn)培(péi)養(yǎng)液(yè)(革蘭氏陽(yáng)性或革(gé)蘭氏陰性)中(zhōng)快(kuài)速簡(jiǎn)單地提取(qǔ)基因(yīn)組(zǔ)DNA的方法；一次可(kě)處(chǔ)理<3ml正處於指數生(shēng)長期的細(xì)菌培養液(1x109細菌(jūn))。
該試(shì)劑盒采用*的(dí)DNA吸附柱(zhù)純(chún)化(huà)方(fāng)式，可在(zài)60分鐘(zhōng)內(nèi)同時(shí)進行一個或多個樣(yàng)品(pǐn)的純化(huà)工作。純(chún)化(huà)過程不需要(yào)用到(dào)酚氯仿(fǎng)抽(chōu)提，也(yě)不(bù)需(xū)要用到耗時的異(yì)丙(bǐng)醇(chún)或乙(yǐ)醇(chún)沉澱(diàn)。
純化(huà)DNA產(chǎn)物可(kě)直接用於(yú)PCR，酶(méi)切(qiē)和雜交(jiāo)等實(shí)驗。一(yī)次抽(chōu)提可純化出(chū)10-30μg的高質(zhì)量(liáng)的基因(yīn)組DNA。此外，貝克(kè)曼DNA純(chún)化(huà)試(shì)劑盒(hé)還可以抽(chōu)提(tí)得到(dào)除基因組(zǔ)以(yǐ)外(wài)遺物質，包括(kuò)質粒(lì)，Cosmid，BAC等。
由於該(gāi)方(fāng)法(fǎ)采(cǎi)用溶(róng)菌(jūn)酶(méi)(Lysozyme)和(hé)玻璃(lí)珠(0.1-0.2mm)共同(tóng)作用來去(qù)除(chú)細(xì)胞壁，因而(ér)可高效地裂解(jiě)細菌(jūn)，保證DNA的有效(xiào)回收。對於(yú)大多(duō)數的陰性或陽性(xìng)細(xì)菌(jūn)，隻(zhī)需(xū)使(shǐ)用溶(róng)菌酶(méi)。
從正處於指(zhǐ)數生長期的(dí)細菌培(péi)養(yǎng)液中(zhōng)收(shōu)集(jí)細(xì)菌，細菌經溶(róng)菌酶去除(chú)細胞壁，蛋白酶(méi)消(xiāo)化細(xì)胞，然後用HiBind矽膠柱結合(hé)DNA，經過兩(liǎng)次快速洗(xǐ)滌，最(zuì)後將DNA溶(róng)解(jiě)在滅菌水(shuǐ)或(huò)低鹽緩(huǎn)衝(chōng)液中(zhōng)。
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更新時(shí)間(jiān)：2021-06-21 
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